三槽梯度PCR儀除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時進(jìn)行多達(dá)12個不同退火溫度的PCR反應(yīng),在梯度模塊上,可實現(xiàn)對梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,自由編程12道溫度,梯度實現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時進(jìn)行熱循環(huán)。僅一次實驗就能確定特定體系相應(yīng)的退火溫度。從而可在短時間內(nèi)對PCR實驗進(jìn)行優(yōu)化,大大提高PCR 科研效率。是針對每臺PCR儀如何設(shè)置合適的退火溫度進(jìn)行摸索。它是以合成引物的退火溫度為參考值,在進(jìn)行同一個PCR反應(yīng)時,同時設(shè)置多個退火溫度進(jìn)行PCR實驗。這些退火溫度呈現(xiàn)梯度遞增或遞減,通過梯度PCR確定適合儀器的退火溫度。
三槽梯度PCR儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序:
1.使用前打開電源,預(yù)熱20分鐘。
2.待機(jī)器自檢完成后,進(jìn)入主界面。
3.點擊“Browse/New Methods”按鍵,進(jìn)入試驗程序設(shè)置。
4.可在下面列表單中選擇近期用戶保存的試驗程序,然后點擊“View/Edit”,進(jìn)行編輯使用;也可直接點擊“New”按鍵,進(jìn)行新的試驗程序設(shè)置。
5.點擊“Add”“Delete”按鍵,可增刪試驗步驟。
6.點擊“Save”按鍵可保存當(dāng)前試驗程序,方便下次試驗使用。
7.待所有試驗程序設(shè)置完畢后,打開熱蓋,加入樣品,應(yīng)盡量使樣品集中在樣品槽中央部位,點擊“Run”按鍵,進(jìn)入試驗狀態(tài)。
8.試驗完成后,取出樣品,關(guān)閉電源。
三槽梯度PCR儀現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Picymerase Chain Reaction , PCR)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。