熒光定量基因擴(kuò)增儀的工作原理非常簡單,當(dāng)反應(yīng)中目標(biāo)DNA被擴(kuò)增時(shí),DNA聚合酶會將熒光探針與DNA結(jié)合,導(dǎo)致熒光信號增強(qiáng)。熒光定量基因擴(kuò)增儀可以通過檢測所選熒光探針熒光信號的變化來監(jiān)測PCR反應(yīng)的進(jìn)程,由此計(jì)算出目標(biāo)DNA的數(shù)量。它可以準(zhǔn)確地測量反應(yīng)中的熒光強(qiáng)度,從而確定特定DNA序列的數(shù)量。在現(xiàn)代生命科學(xué)中,熒光定量基因擴(kuò)增儀已經(jīng)成為了基礎(chǔ)研究、臨床診斷和藥物開發(fā)等領(lǐng)域中*工具。
熒光定量基因擴(kuò)增儀的優(yōu)勢在于其高度靈敏的檢測能力。相對于傳統(tǒng)的凝膠電泳分析方法,熒光定量基因擴(kuò)增儀能夠在較短的時(shí)間內(nèi)分析出目標(biāo)DNA的數(shù)量,而且檢測的結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。另外,熒光定量基因擴(kuò)增儀還能夠?qū)崿F(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)測PCR反應(yīng)的進(jìn)程,這對于快速評估樣本的質(zhì)量和檢測PCR反應(yīng)是否成功至關(guān)重要。在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用非常廣泛。在基因表達(dá)分析、基因變異檢測、病原體檢測和診斷等研究領(lǐng)域里,熒光定量基因擴(kuò)增儀被廣泛應(yīng)用。例如,通過定量PCR分析血液樣本中的病原體DNA,并比較不同樣本的DNA含量,可以快速準(zhǔn)確地檢測出病原體感染的情況,這種方法已經(jīng)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用。
熒光定量基因擴(kuò)增儀的操作步驟:
1.將熒光定量基因擴(kuò)增儀接通電源,按照儀器的操作指南打開軟件。
2.準(zhǔn)備好需要檢測的樣品和試劑,將樣品和試劑分別加入到96孔板中。
3.程序設(shè)置:選擇擴(kuò)增程序,設(shè)置擴(kuò)增步驟和參數(shù),選擇熒光信號監(jiān)測。
4.熒光檢測:將孔板放入儀器中,啟動檢測程序,觀察熒光信號。
5.數(shù)據(jù)分析:按照儀器軟件的指引將檢測到的熒光信號轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的數(shù)據(jù),并進(jìn)行分析。
熒光定量基因擴(kuò)增儀的維護(hù)保養(yǎng)方法:
1.定期清潔:清洗儀器的外部和內(nèi)部,尤其是檢測通道,以避免雜質(zhì)影響檢測。
2.正確使用:按照儀器的正常操作方法使用儀器,不要強(qiáng)行打開或修改儀器。
3.使用硬件和軟件均要適當(dāng)升級:及時(shí)更換損壞的部件,升級軟件以提高儀器的效率和穩(wěn)定性。
4.存儲:將儀器存放在干燥、通風(fēng)和對溫度、濕度有一定范圍內(nèi)的地方,以避免儀器受潮、受潛在損壞。