96孔PCR儀的原理就是通過(guò)控制加熱塊的溫度來(lái)完成PCR的不同步驟。加熱塊通常是一個(gè)具有96個(gè)孔的金屬塊,每個(gè)孔都裝有PCR反應(yīng)混合液。加熱塊的溫度可以根據(jù)特定的PCR程序進(jìn)行控制。其溫度控制系統(tǒng)通常由Peltier芯片構(gòu)成,這種芯片能夠在電流通過(guò)時(shí)產(chǎn)生熱量或制冷效果。通過(guò)改變電流方向,可以實(shí)現(xiàn)加熱或制冷的功能。傳感器可以監(jiān)測(cè)加熱塊的溫度,并將所測(cè)到的溫度信息傳輸給控制裝置。
控制裝置根據(jù)預(yù)設(shè)的PCR程序來(lái)控制加熱塊的溫度變化。例如,在PCR的變性步驟中,控制裝置會(huì)將加熱塊的溫度提高至95℃。在退火步驟中,溫度會(huì)降低至目標(biāo)序列引物的退火溫度。在延伸步驟中,溫度會(huì)再次升高至適合延伸酶活性的溫度。還可以通過(guò)冷卻系統(tǒng)來(lái)控制溫度。冷卻系統(tǒng)通常使用制冷劑或Peltier芯片來(lái)制冷。通過(guò)這種方式,96孔PCR儀能夠高效地?cái)U(kuò)增特定DNA片段,并在短時(shí)間內(nèi)得到大量DNA產(chǎn)物。
96孔PCR儀廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:
1.分子生物學(xué)研究:用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)的擴(kuò)增、檢測(cè)和定量分析,如基因表達(dá)、突變分析、遺傳疾病診斷、病毒檢測(cè)等。
2.醫(yī)學(xué)診斷:用于臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原微生物的PCR診斷,如流感病毒、結(jié)核菌等的檢測(cè)。
3.基因工程:用于構(gòu)建重組DNA、插入基因、基因克隆和基因編輯等生物技術(shù)操作。
4.農(nóng)業(yè)科學(xué):用于作物遺傳改良、病害檢測(cè)和鑒定、品種鑒定等領(lǐng)域。
5.基礎(chǔ)研究:用于生物學(xué)、遺傳學(xué)、進(jìn)化論等研究領(lǐng)域,探索基因功能、演化關(guān)系等。
6.法醫(yī)學(xué):用于鑒定DNA樣本的來(lái)源,進(jìn)行法醫(yī)學(xué)分析和現(xiàn)場(chǎng)DNA檢測(cè)。
7.環(huán)境監(jiān)測(cè):用于水質(zhì)、土壤和大氣中微生物的檢測(cè)和監(jiān)測(cè),研究環(huán)境中的生物多樣性和生態(tài)系統(tǒng)。
8.科學(xué)教育:用于學(xué)生進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技能和科學(xué)思維能力。